

贝博® BBcellProbe® C28活细胞染色试剂盒是利用BBcellProbe® C系列探针进行活细胞染色的试剂盒。本试剂盒中的BBcellProbe® C28细胞染色探针为橙红色荧光标记的细胞质探针,具有562 / 576 nm的最大激发/发射波长。
BBcellProbe® C系列探针是对活细胞的细胞质进行选择性染色的一类荧光染料,该系列探针可以选择性标记细胞质,只需要纳摩尔级(nM)浓度即可有效标记活细胞。BBcellProbe® C系列探针可自由穿过细胞膜,适用于观察细胞质内部生物合成及相关发病机理。
BBcellProbe® C系列细胞质探针具有多种颜色可以选择,可根据情况对样品进行多色标记实验。除了本试剂盒的橙红色荧光探针,贝博还可以提供绿色、蓝色、红色等颜色的染色试剂盒。
BBcellProbe® C28细胞橙红色荧光探针有极强的疏水性,能够轻易穿透活细胞膜,进入细胞后,被细胞内的酯酶剪切形成膜非渗透性的极性分子,从而被滞留在细胞内,使胞质发出强橙红色荧光。橙色荧光产物的最大激发波长562 nm,最大发射波长576 nm。可以使用流式细胞仪或激光共聚焦显微镜检测细胞。
C28细胞橙红色荧光可以存活至少24小时,使该探针成为优异的长期细胞示踪剂。该探针标记后,细胞可以进行固定,进行其它的实验,对荧光的影响较小。
贝博® BBcellProbe® 可以提供各种细胞分析试剂盒。包括细胞凋亡、活性、增殖、毒性、活性氧、周期、细胞代谢、氧化应激、膜流动性、膜电位、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、胞外酸化、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种细胞检测试剂盒产品。
贝博® BBcellProbe® 可以为您提供各种细胞成像、细胞示踪与追踪试剂盒产品。包括各种颜色的BBcellProbe® M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品,以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。
2. 染色液A为DMSO溶液,冬季气温较低时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3. 可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
4. 试剂拆封后请尽快使用完!
2. 荧光显微镜
3. 流式细胞仪
4. 荧光酶标仪
2. 贴壁细胞
2. 荧光显微镜
3. 流式细胞仪
4. 荧光酶标仪
2. 离心机
3. 移液器
4. 冰箱
5. 冰盒
2. 吸头
3. 一次性手套
4. 荧光检测专用的黑色96孔板
2. 使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
3. BBcellProbe® C28探针容易受潮,受潮后稳定性较差,注意干燥保存。
4. 吸取BBcellProbe® C28探针母液时要用干燥的新吸头,不能使用含水的吸头。
5. 未使用完的BBcellProbe® C28探针母液请拧紧螺旋盖,避免受潮失效。
6. BBcellProbe® C28探针工作液含水,配制后不可以长期保存,须现配现用。
7. 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
8. 标记的条件因细胞种类而异,根据不同样本的实际染色结果做相应调整,在每次实验前,请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化,确定最佳条件。以下方法仅供参考。
9. 贴壁细胞可以制备成细胞悬液染色,也可以原位染色,请根据实际样本需要染色。
10. 染色后立即进行分析。
根据样本数量,用染料稀释液将BBcellProbe® C28荧光染料10倍稀释,再用HBSS缓冲液50-100倍稀释,配制成染色工作液。
2. 细胞染色
2.1 对于贴壁细胞
1)将细胞置于培养皿中的盖玻片上,加入合适培养基,使其爬片生长。
2)待细胞生长到合适丰度,吸除培养液,加入适量37℃预热的含探针工作液。于生长状态下孵育20分钟~2小时(具体孵育时间需根据细胞类型而定)。
3)利用新鲜培养基替换上述染色液并在荧光显微镜(含合适滤片)下观察。
2.2 对于悬浮细胞
1)离心,吸除上清。
2)利用37℃预热的探针工作液重悬细胞,于生长状态下孵育20分钟~2小时(具体时间需根据细胞类型而定)。
3)离心,吸除染色液,加入新鲜培养液重悬细胞。
4)置于荧光镜下观察。
3. 观察结果:
在激光共聚焦/流式/荧光显微镜(含合适滤片)检测细胞,测荧光强度。
最大激发/发射波长为560 nm / 576 nm。
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